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當前位置:首頁新聞中心上皮細胞組織消化手冊

上皮細胞組織消化手冊

更新時間:2016-02-16點擊次數:1612

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Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養和細胞生物學研究的原代細胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經普遍應用多年,但是對其組織消化和細胞收集的作用機制卻沒有全面的理解。  由此導致的結果便是選擇一種消化方法大多是隨機選擇或基于過去的經驗,而不是在*理解消化原理的基礎上選擇的消化方案,以及如何根據具體實驗目的修正消化方案以獲得更好的實驗結果。

細胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個細胞,而影響結果的原因有很多,包括(不限于)以下:

1、組織類型

2、物種來源

3、動物年齡

4、遺傳改造情況(如knockouts

5、所用的消化培養液

6、所用的酶

7、消化酶中的雜質

8、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10孵育時間

通常前四個原因沒辦法選擇,而剩下的原因一般由經驗決定以獲取zui適實驗結果。

通過查閱文獻來選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實驗數據搞得一頭霧水。這些巨大差異來源于組織胞外基質的復雜而動態的特性,以及過去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外,組織胞外基質由各種蛋白、糖蛋白、脂類和糖脂組成,這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發育(年齡)之間存在明顯的差異,這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶,如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。

本指南總結了目前常用組織消化酶的zui適消化和細胞收集知識和方法,描述了標準的實驗步驟, 便于制定一個*的細胞分離方案,同時列舉了一些相關的參考文獻。

下表列出多種組織的適宜消化酶(含參考文獻,以組織類型和物種分類,詳見鏈接)

脂肪組織

腎上腺組織

骨組織

腦組織

軟骨組織

結腸組織

內皮組織

上皮組織

心臟

淋巴結

乳腺

其它組織

其他組織

肌組織

神經組織

胰腺

腮腺

垂體

前列腺

生殖

動物鱗片

皮膚

脾臟

干細胞

胸腺

甲狀腺/甲狀旁腺

扁桃體

腫瘤

 

 

 

注:使用Worthington公司消化酶的文獻不限于上表鏈接中所列,一般而言,Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化。

 

上皮細胞組織消化手冊

 

物種詳細來源細胞名稱消化用酶培養基參考文獻
牛, fetalEpithelialNeutral Protease: 2%Dissociation medium, CMFSchumann, B.L., Cody, T.E., Miller, M.L., Leikauf, G.D.: Isolation, Characterization, and Long-Term Culture of Fetal Bovine Tracheal Epithelial Cells, In Vitro Cell Dev Biol 24, 211, 1988
Tracheal
TrachealPronase: 0.1%DMEMVirmani, A., Naziruddin, B., Desai, V., Lowry, J., Graves, D., and Sachdev, G.:Evidence for Secretion of High Molecular Weight Mucins by Canine Tracheal Epithelial Cells in Primary Culture: Effects of Select Secretagogues on Mucin Secretion, In Vitro Cell Dev Biol 28A, 120, 1992
小雞, 5 天大Intestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
鯊魚(海綠角鯊)Rectal glandCollagenase: 0.2%Ringer's solutionKarnaky, Jr., K.J., Valentich, J.D., Currie, M.G., Oehlenschlager, W.F., and Kennedy, M.P.: Atriopeptin Stimulates Chloride Secretion in Cultured Shark Rectal Gland Cells, Am J Physiol 260, 1125, 1991
鯊魚(海綠角鯊)Rectal glandCollagenase: 0.2%Ringer's solutionValentich, J: J Tiss Cul Meth 13, 149, 1991
美洲擬鰈, 200-500 克Renal tubuleTrypsin: 0.2%CMF solutionDickman, K.G., and Renfro, J.: Primary Culture of Flounder Renal Tubule Cells: Transepithelial Transport, Am J Physiol 251, 424, 1986
(黃蓋美洲)
青蛙青蛙, 有爪蟾蜍, 成年的, 雌性Colonic epithelialCollagenase Type 4: 0.1%Kreb'sHeinke, B, and Clauss, W.: Potassium Conductances in Isolated Single Cells fromXenopus Laevis Colonic Epithelium, J Comp Physiol [B] 169, 148, 1999
豚鼠Hartley豚鼠, 雌性, 200 克EpithelialCollagenase Type 1: 0.1%DMEMRutten, M.: Use of Commerically Available Cell Culture Inserts for Primary Culture and Electrophysiologic Studies of Guinea Pig Gastric Mucous Epithelial Cells, J Tiss Cul Meth 14, 235, 1992
豚鼠豚鼠, 哈特利白化,EndometrialCollagenase: 0.25%HBSSChaminadas, G., Alkhalaf, M., Remy-Martin, J.P., Propper, A.Y., and Adessi, G.L.: Specific Effect of Oestrone Sulphate on Protein Synthesis and Secretion by Cultured Epithelial Cells from Guinea-pig Endometrium, J Endocrinol 123, 233, 1989
500-600 克
倉鼠倉鼠, 敘利亞黃金, 雄性, 100-120 克TrachealPronase: 0.1%MEM with Hepes, CMFNiles,R., Kim, K.C., Hyman, B., Christensen, T., Wasano, K., Brody, J.:Characterization Of Extended Primary And Secondary Cultures Of Hamster Tracheal Epithelial Cells, In Vitro Cell Dev Biol 24, 457, 1988
倉鼠倉鼠, 敘利亞黃金 (鉻:RGH應變)TrachealTrypsin: 0.1%Ham's F-12McDowell, E., et al.: Differentiation of Tracheal Mucociliary Epithelium in Primary Cell Culture Recapitulates Normal Fetal Development and Regeneration Following Injury in Hamsters, Am J Pathol 129, 511, 1987
倉鼠倉鼠 (血統1516 EHS 和 萊克維尤), 8-12 周TrachealTrypsin: 0.05%Medium 199Lee, T., Wu, R., Brody, A., Barrett, J., and Nettesheim, P.: Growth and Differentiation of Hamster Tracheal Epithelial Cells in Culture, Exp Lung Res 6, 27, 1984
倉鼠倉鼠,敘利亞黃金, 雄性, 6 周- 4 個月TrachealTrypsin: 0.25%PBS with EDTAGoldman, W.E., Baseman, J.B.: Selective Isolation and Culture of a Proliferating Epithelial Cell Population from the Hamster Trachea, In Vitro 16, 313, 1980
人類人類Human tracheal epitheliumProtease Type XIV: 0.04%DMEM/F12Widdicombe JH, Sachs LA, Morrow JL, and Finkbeiner WE.: Expansion of cultures of human tracheal epithelium with maintenance of differentiated structure and function, Biotechniques 39(2), 249, 2005
人類人類Colonic epithelialCollagenase: RPMI 1640Fukushima, K. and Fiocchi, C.: Paradoxical Decrease of Mitochondrial DNA Deletions in Epithelial Cells of Active Ulcerative Colitis Patients., Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 286, G804-13, 2004
Neutral Protease: 0.3%
Deoxyribonuclease I: 0.05%
人類人類Corneal limbal epithelial sheetNeutral Protease: 5%see referenceEspana EM, Romano AC, Kawakita T, Di Pascuale M, Smiddy R, and Tseng SC:Novel enzymatic isolation of an entire viable human limbal epithelial sheet, Inv Ophthal Visual Sci 44(10), 4275, 2003
人類人類Intestinal epithelialCollagenase Type 4: 72.5 u/mlHBSSFahlgren, A., Hammarstrom, S., Danielsson, A. and Hammarstrom, M.:Increased Expression of Antimicrobial Peptides and Lysozyme in Colonic Epithelial Cells of Patients with Ulcerative Colitis., Clin Exp Immunol 131, 90, 2003
人類人類Gastric epithelial cellsCollagenase Type 2: 200 u/mlL-15Smoot, D., Sewchand, J., Young, K., Desbrodes, B., Allen, C. and Naab, T.: A Method for Establishing Primary Cultures of Human Gastric Epithelial Cells,Meth Cell Sci 22, 133, 2000
Neutral Protease: 1.2 u/ml
Soybean Trypsin Inhibitor: 0.125%
人類人類GastricCollagenase Type 4: 0.01%F-12 mediumSarosiek, J, Marshall, B, Peura, D, Guerrant, L, McCallum, R and Little, C: The Isolation and Maintenance of Human Gastric Epithelial Cells in Primary Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12B:10.1, 1995
人類人類Nasal polyp epithelialNeutral Protease: .004%see referenceHalbert CL, Alexander IE, Wolgamot GM, Miller AD: Adeno-associated virus vectors transduce primary cells much less efficiently than immortalized cells, J Virol 69, 1473-9, 1995
Trypsin: 0.1%
人類人類EpithelialTrypsin: 0.05%DMEMSabatini, L., Allen-Hoffmann, B, Warner, T., and Azen, E.: Serial C*tion of Epithelial Cells from Human and Macaque Salivary Glands, In Vitro Cell Dev Biol27A, 939, 1991
人類人類EpithelialTrypsin: 0.2%MEM, PBSRobinson, C., and Wu, R.: Culture of Conducting Airway Epithelial Cells in Serum-Free Medium, J Tiss Cul Meth 13, 95, 1991
人類人類EpithelialCollagenase: 2.0%DMEM/Ham's F-12Emerman, J. and Wilkinson, D.: Routine Culturing of Normal, Dysplastic and Malignant Human Mammary Epithelial Cells from Small Tissue Samples, In Vitro Cell Dev Biol 26, 1186, 1990
人類人類EpithelialPronase: 0.1%PBSGruenert, D.C., Basbaum, C.B., and Widdicombe, J.H.: Long-Term Culture of Normal and Cystic Fibrosis Epithelial Cells Grown Under Serum-Free Conditions, In Vitro Cell Dev Biol 26, 411, 1990
人類人類EpithelialCollagenase Type 2: 0.2%(see reference)Wood, L. and Neufeld, E.: A Cystic Fibrosis Phenotype in Cells Cultured from Sweat Gland Secretory Coil. Altered Kinetics of 36Cl Efflux, J Biol Chem 265, 12796, 1990
Sweat gland
人類人類Endometrial epithelialTrypsin: DMEM/Ham's F-12Munson, L., Chandler, S., and Schlafer, D.: C*tion of Bovine Fetal and Adult Endometrial Epithelial Cells, J Tiss Cul Meth 11 (3), 129, 1988
(包括 牛)
人類人類EpithelialDeoxyribonuclease I: 0.01%HEPES with 5.9mM Glucose,5mM DTTWiddicombe, J.H., Coleman, D.L., Finkbeiner, W.E., and Tuet, I.K.: Electrical Properties of Monolayers Cultured From Cells of Human Tracheal Mucosa, J Appl Physiol 58, 1729, 1985
人類人類EpithelialProtease Type XIV: 0.1%Eagle's MEMYankaskas, J., Cotton, C., Knowles, M., Gatzy, J., and Boucher, R.: Culture of Human Nasal Epithelial Cells on Collagen Matrix Supports, Am Rev Respir Dis 132, 1281, 1985
人類人類,女人, 27-49 歲EpithelialTrypsin: 0.125%HBSS, CMFAuersperg, N., Siemens, C.H., and Myrdal, S.E.: Human Ovarian Surface Epithelium In Primary Culture, In Vitro 20, 743, 1984
Ovary
人類人類,嬰兒和新生兒EpithelialTrypsin: 0.1%HBSSLechner, J., Babcock, M., Marnell, M., Narayan, K., and Kaighn, M.: Normal Human Prostate Epithelial Cell Cultures, Methods Cell Biol 21, 195, 1980
Prostate
小鼠小鼠, 成年的Cilary epithelialPDS kit: per instructionsEBSSGualdoni, S., Baron, M., Lakowski, J., Decembrini, S., Pearson, R., Ali, R. and Sowden, J.: Isolation and Culture of Adult Ciliary Epithelial Cells, Previously Identified as Retinal Stem Cells, and Retinal Progenitor Cells., Curr Protoc Stem Cell Biol Chapter 1, Unit 1H.4, 2011
小鼠小鼠, 雄性, 8-16 周Renal tubular epithelialCollagenase: 200 u/mlHBSSBreggia, A. and Himmelfarb, J.: Primary Mouse Renal Tubular Epithelial Cells have Variable Injury Tolerance to Ischemic and Chemical Mediators of Oxidative Stress.,Oxid Med Cell Longev 1, 33, 2008
Soybean Trypsin Inhibitor: see reference
小鼠小鼠, 6-8 周Lamina propria mononuclear cellsCollagenase Type 2: 0.015%RPMIWirtz S., Becker C., Blumberg R., Galle P., and Neurath M.: Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA, J Immunol 168(1), 411, 2002
Deoxyribonuclease I: 0.01%
小鼠小鼠, 11 周EpithelialCollagenase Type 3: 25 u/mlDMEM/F12Mueller, S., Clark, J., Myers, P. and Korach, K.: Mammary Gland Development in Adult Mice Requires Epithelial and Stromal Estrogen Receptor Alpha.,Endocrinology 143, 2357, 2002
Hyaluronidase: 0.1%
Protease XIV: 0.05%
Deoxyribonuclease I: 0.04%
小鼠小鼠, 雌性Salivary gland epithelialCollagenase Type 1: 750 u/mlDMEM/F12Ishimaru N, Saegusa K, Yanagi K, Haneji N, Saito I, Hayashi Y: Estrogen deficiency accelerates autoimmune exocrinopathy in murine Sjogren's syndrome through fas-mediated apoptosis, Am J Pathol 155, 173-81, 1999
Hyaluronidase: 500 u/ml
小鼠小鼠, 胎兒12-13 天Intestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
小鼠小鼠Submandibular salivaryCollagenase Type 2 or 3: 0.16%DMEMDurban, E: Submandibular Salivary Epithelial Cells,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12B:2.1, 1995
小鼠小鼠EsophagealTrypsin: 0.25%PBS, CMFKatayama, M., Kan, M.: Heparin-Binding (Fibroblast) Growth Factors re Potential Autocrine Regulators of Esophageal Epithelial Cell Proliferation, In Vitro Cell Dev Biol 27, 533, 1991
小鼠小鼠, 成年的, 雌性, 6-8周大UterineTrypsin: 0.2%HBSSGhosh, D., Danielson, K., Alston, J., and Heyner, S.: Functional Differentiation of Mouse Uterine Epithelial Cells Grown on Collagen Gels or Reconstituted Basement Membranes, In Vitro Cell Dev Biol 27A, 713, 1991
小鼠小鼠, 雌性, 18 - 20天UterineTrypsin: 0.25%HBSSFukamachi, H., and McLachlan, J.: Proliferation and Differentiation of Mouse Uterine Epithelial Cells in Primary Serum-Free Culture: Estradiol-17B Suppresses Uterine Epithelial Proliferation Cultured on a Basement Membrane-Like Substratum,In Vitro Cell Dev Biol 27A, 907, 1991
(包括 20 - 22 天)
小鼠小鼠, (白變種實驗室老鼠), 雄性, 3-5 月EpithelialCollagenase Type 3: 0.16% , 1:1 v/vDMEM with 15 mM HEPESDurban, E.M.: Mouse Submandibular Salivary Epithelial Cell Growth and Differentiation in Long-Term Culture:Influence of the Extracellular Matrix, In Vitro Cell Dev Biol 26, 33, 1990
Submandibular salivary gland
小鼠小鼠, 雌性EpithelialPepsin: 0.1%HBSSReiser, M., Huff, B., and Medina, D.: Pepsin Can be Used to Subculture Viable Mammary Epithelial Cells, In Vitro 19 (9), 730, 1983
小鼠小鼠, (白變種實驗室老鼠fC3H or白變種實驗室老鼠) 8-12 天中孕EpithelialCollagenase Type 3: 0.1%HBSSYang, J., Flynn, D., Larson, L., and Hamamoto, S.: Growth in Primary Culture of Mouse Submandibular Epithelial Cells, In Vitro 18, 435, 1982
Submandibular gland
小鼠小鼠 (白變種實驗室老鼠fC3H)Mammary tumorsCollagenase: 1.0%HBSSYang, J., Guzman, R., Richards, J., and Nandi, S.: Primary Cultures of Mouse Mammary Tumor Epithelial Cells Embedded in Collagen Gels, In Vitro 16, 502, 1980
Epithelial
小鼠小鼠, C3H, 6-8 周EpithelialCollagenase: 0.10%DMEMLillehaug, J., Mondal, S., and Heidelberger, C.: Establishment of Epithelial Cell Lines from Mouse Regenerating Liver, In Vitro 15, 910, 1979
豬, 5-60 公斤Retinal pigment epithelial cellsCollagenase: 2%DMEMWiencke, A., Kiilgaard, J., Nicolini, J., Bundgaard, M., Ropke, C., and La Cour, M.: Growth of Cultured Porcine Retinal Pigment Epithelial Cells, Acta Opthalmol Scand 81(2), 170, 2003
TracheaNeutral Protease: 0.2%HBSSDe Buysscher, E., Kennedy, J., and Mendicino, J.: Synthesis of Mucin Glycoproteins by Epithelial Cells Isolated from Swine Trachea by Specific Proteolysis, In Vitro 20, 433, 1984
兔, 新西蘭白, 成年的ColonNeutral Protease: 0.3%PBSVidrich, A., Racindranath, R., Farsi, K., and Targan, S.: A Method for the Rapid Establishment of Normal Adult Mammalian Colonic Epithelial Cell Cultures, In Vitro Cell Dev Biol 24 (3), 188, 1988
兔, 新西蘭白, 雄性, 4-5磅GastricCollagenase Type 2: 0.08%Sodium phosphate bufferChew, C.S., Brown,M.R.: Release of Intracellular Ca2+ and Elevation of Inositol Triphosphate by Secretagogues in Parietal and Chief Cells Isolated from Rabbit Gastric Mucosa, Biochim Biophys Acta 888, 116, 1986
Parietal and chief
兔, 新西蘭白 動情期的,雌性, 4-5 個月Mesothelial and surface epithelialTrypsin: 0.125%-0.5%Medium 199Nicosia, S., Johnson, J., and Streibel, E.: Isolation and Ultrastructure of Rabbit Ovarian Mesothelium(Surface Epithelium), Int J Gynecol Pathol 3, 348, 1984
Ovaries
兔, 胎兒的EpithelialCollagenase Type 3: 0.10%HBSSLogsdon, C.D., Bisbee, C.A., Rutten, M.J. and Machen, T.E.: Fetal Rabbit Gastric Epithelial Cells Cultured on Floating Collagen Gel, In Vitro 18, 233, 1981
Gastric
大鼠大鼠Mammary epithelialCollagenase Type 3: 0.35%HBSSMei, N., McDaniel, L., Dobrovolsky, V., Guo, X., Shaddock, J., Mitstaedt, R., Azuma, M., Shelton, S., McGarrity, L., Doerge, D. and Heflich, R.: The Genotoxicity of Acrylamide and Glycidamide in Big Blue Rats., Toxicol Sci 115, 412, 2010
大鼠大鼠, SD, 成年的,男性, 8-10 周大Seminiferous tubulesTrypsin: 0.05%Krebs-Ringer bicarbonate bufferAbou-Haila, A., and Tulsiani, D.: Acid Glycohydrolases in Rat Spermatocytes, Spermatids and Spermatozoa: Enzyme Activities, Biosynthesis and Immunolocalization, Biol Proced Online 3 (1), 35, 2001
(see reference)
大鼠大鼠, 男性Alveolar epithelialElastase: 40 u/mlDMEMPlanus, E., Galiacy, S., Matthay, M., Laurent, V., Gavrilovic, J., Murphy, G., Clerici, C., Isabey, D., Lafuma, C., and d'Ortho, M.: Role of Collagenase in Mediating in Vitro Alveolar Epithelial Wound Repair, J Cell Sci 112, 243, 1999
大鼠大鼠, 胚胎Tracheal epithelialCollagenase Type 4: 0.05%DMEM/F12Shannon JM, Gebb SA, and Nielsen LD: Induction of alveolar type II cell differentiation in embryonic tracheal epithelium in mesenchyme-free culture,Development 126, 1675, 1999
Neutral Protease: 
Deoxyribonuclease I: 
大鼠大鼠, fetal, 14-15 dayIntestinal mesenchymal and epithelialCollagenase: 0.03%DMEMSimon-Assmann, P and Kedinger, M: Embryonic Gut-Dissagregated Culture,Cell & Tissue Culture: Laboratory Procedures Vol. 1,Doyle, A., Griffiths, J., and Newell, D., John Wiley and Sons, Ltd., 12A:3.1, 1995
大鼠大鼠, 4-14 周Retinal pigment epithelial cellsCollagenase Type 1: 65 u/mlCF Hanks with EDTAWang N, Koutz CA, and Anderson RE.: A method for the isolation of retinal pigment epithelial cells from adult rats, Inv Ophthal Visual Sci 34(1), 101, 1993
Hyaluronidase: 220 u/ml
大鼠大鼠, SD, 成年的, 90-120 日大, 350-450克Epididymal epithelialCollagenase Type 2: 0.1%HBSSKlinefelter, G.: A Novel System for the Co-Culture of Epididymal Epithelial Cells and Sperm From Adult Rats, J Tiss Cul Meth 14, 195, 1992
大鼠大鼠, 6 天大Rat intestinal epithelialNeutral Protease: 0.01%DMEMEvans GS, Flint N, Somers AS, Eyden B, and Potten CS.: The development of a method for the preparation of rat intestinal epithelial cell primary cultures, J Cell Sci 101, 219, 1992
Collagenase: 300 u/ml
大鼠大鼠, SD, 雄性, 150 - 250克EpithelialPronase: 0.15%Medium 199Dial, E., Kao, Y., and Lichtenberger, L.: Effects of 16,16-Dimethyl Prostaglandin E2 On Glycoprotein And Lipid Synthesis of Gastric Epithelial Cells Grown in a Primary Culture, In Vitro Cell Dev Biol 27, 39, 1991
Stomach
大鼠大鼠, 成年的Interlobular duct fragmentsPapain: DMEM/Ham's F-12Heimann, T., and Githens, S.: Rat Pancreatic Duct Epithelium Cultured on a Porous Support Coated with Extracellular Matrix, Pancreas 6 (5), 514, 1991
(包括 倉鼠)
大鼠大鼠, SD, 200 克ColonDeoxyribonuclease I: 10 礸/ml(see reference)Yassin, R., Clearfield, H., Katz, S., and Murthy, S.: Gastrin Induction of mRNA Expression in Rat Colonic Epithelium In Vitro, Peptides 12, 63, 1991
大鼠Wistar大鼠,  新生的EpithelialTrypsin: 0.1%HBSSJassal, D., Han, R., Caniggia, I., Post, M., and Tanswell, A.: Growth of Distal Fetal Rat Lung Epithelial Cells in a Defined Serum-Free Medium, In Vitro Cell Dev Biol27A, 625, 1991
大鼠嚙齒目動物, 各種各樣的 (參考)EpithelialTrypsin: 0.2%MEM, PBSRobinson, C., and Wu, R.: Culture of Conducting Airway Epithelial Cells in Serum-Free Medium, J Tiss Cul Meth 13, 95, 1991
大鼠大鼠, 6-8 天Retinal pigment epithelialNeutral Protease: 2%DMEMChang CW, Roque RS, Defoe DM, and Caldwell RB.: An improved method for isolation and culture of pigment epithelial cells from rat retina, Curr Eye Res10(11), 1081, 1991
大鼠大鼠 (ACI/NMs X BUF/Mna) F1, 雄性, 28個 月EpthelialCollagenase Type 3: 0.1%Eagle's MEM Serum-freeMasuda, A., Ohtsuka, K., and Matsuyama, M.: Establishment of Functional Epithelial Cell Lines from a Rat Thyoma and a Rat Thymus, In Vitro Cell Dev Biol 26, 713, 1990
大鼠 (ACI/MNs) 雄性, 8周
大鼠大鼠, 費希爾344, 雄性, 8 周大,Tracheal epithelialPronase: 0.5%DMEMChang, L., Wu, R., and Nettesheim, P.: Morphological Changes in Rat Tracheal Cells During The Adaptive and Early Growth Phase in Primary Cell Culture, J Cell Sci74, 283, 1985
250-300 克
大鼠大鼠,費希爾, 雄性, 4-6 周EpithelialHyaluronidase: 0.1%HEPES BSSBabcock, M., Marino, M., Gunning, W., and Stoner, G.: Clonal Growth and Serial Propagation of Rat Esophageal Epithelial Cells, In Vitro 19, 403, 1983
Esophagus
大鼠大鼠, 費希爾, Lewis and SD, 雄性, 10-18 個月EpithelialTrypsin: 0.05%HBSS CMFHerring, A., Raychaudhuri, R., Kelley, S., and Iybe, P.: Repeated Establishment of Diploid Epithelial Cell Cultures from Normal and Partially Hepatectomized Rats,In Vitro 19, 576, 1983
大鼠大鼠, SD, 雌性Epithelial, cancer and tumorCollagenase: 0.1%Eagles's MEMCohen, L.: Isolation and Characterization of a Serially C*ted, Neoplastic, Epithelial Cell Line from the N-nitrosomethylurea Induced Rat Mammary Adenocarcinoma, In Vitro 18, 565, 1982
大鼠Wistar大鼠, 12 天EpithelialTrypsin: 0.05%HBSS, CMFMalan-Shibley, L., and Iype, P.: Influence of Cultures on Cell Morphology/Tyrosine Aminotransferase Levels, Exp Cell Res 131, 363, 1981
大鼠大鼠,費希爾, 成年的, 200-250 克EpithelialHyaluronidase: 0.0075%KCl-NaCl HEPES BufferWilliams, G., and Gunn, J.: Long-Term Culture of Adult Rat Liver Epithelial Cells,Exp Cell Res 89, 139, 1974
大鼠Fischer大鼠,  10 天Epithelial-likeTrypsin: 0.25%PBSWilliams, G., Weisburger, E., and Weisburger, J.: Isolation and Long-Term Cell Culture of Epithelial-Like Cells from Rat Liver, Exp Cell Res 69, 106, 1971

 

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